(ნაკადური ციტომეტრია, FCM) არის უჯრედული ანალიზატორი, რომელიც ზომავს შეღებილი უჯრედული მარკერების ფლუორესცენციის ინტენსივობას. ეს არის მაღალტექნოლოგიური ტექნოლოგია, რომელიც შემუშავებულია ცალკეული უჯრედების ანალიზსა და დახარისხებაზე. მას შეუძლია სწრაფად გაზომოს და კლასიფიცირება გაუკეთოს უჯრედების ზომას, შინაგან სტრუქტურას, დნმ-ს, რნმ-ს, ცილებს, ანტიგენებს და სხვა ფიზიკურ თუ ქიმიურ თვისებებს და შეიძლება ეფუძნებოდეს ამ კლასიფიკაციების კრებულს.
ნაკადის ციტომეტრი ძირითადად შემდეგი ხუთი ნაწილისგან შედგება:
1 ნაკადის კამერა და სითხის სისტემა
2 ლაზერული სინათლის წყარო და სხივის ფორმირების სისტემა
3 ოპტიკური სისტემა
4 ელექტრონიკა, შენახვა, ჩვენება და ანალიზის სისტემა
5 უჯრედების დახარისხების სისტემა
მათ შორის, ლაზერული სინათლის წყაროსა და სხივის ფორმირების სისტემაში ლაზერული აგზნება ფლუორესცენტული სიგნალების ძირითადი საზომია ნაკადურ ციტომეტრიაში. აგზნების სინათლის ინტენსივობა და ექსპოზიციის დრო დაკავშირებულია ფლუორესცენტული სიგნალის ინტენსივობასთან. ლაზერი არის კოჰერენტული სინათლის წყარო, რომელსაც შეუძლია უზრუნველყოს ერთტალღოვანი, მაღალი ინტენსივობის და მაღალი სტაბილურობის განათება. ის იდეალური აგზნების სინათლის წყაროა ამ მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად.
ლაზერის წყაროსა და ნაკადის კამერას შორის ორი ცილინდრული ლინზაა. ეს ლინზები ლაზერული წყაროდან გამოსხივებულ წრიული განივი კვეთის მქონე ლაზერულ სხივს უფრო მცირე განივი კვეთის მქონე (22 μm × 66 μm) ელიფსურ სხივად ამახვილებს. ამ ელიფსურ სხივში ლაზერული ენერგია ნორმალური განაწილების მიხედვით ნაწილდება, რაც უზრუნველყოფს ლაზერის აღმოჩენის არეალში გამავალი უჯრედების თანმიმდევრულ განათების ინტენსივობას. მეორეს მხრივ, ოპტიკური სისტემა შედგება ლინზების, ნახვრეტებისა და ფილტრების მრავალი ნაკრებისგან, რომლებიც დაახლოებით შეიძლება დაიყოს ორ ჯგუფად: ნაკადის კამერის ზემოთ და ქვემოთ.
ნაკადის კამერის წინ მდებარე ოპტიკური სისტემა შედგება ლინზისა და ნახვრეტისგან. ლინზისა და ნახვრეტის (როგორც წესი, ორი ლინზა და ერთი ნახვრეტი) მთავარი ფუნქციაა ლაზერული წყაროს მიერ გამოსხივებული წრიული განივი კვეთის მქონე ლაზერული სხივის ფოკუსირება უფრო მცირე განივი კვეთის მქონე ელიფსურ სხივში. ეს ანაწილებს ლაზერულ ენერგიას ნორმალური განაწილების მიხედვით, რაც უზრუნველყოფს უჯრედების თანმიმდევრულ განათების ინტენსივობას ლაზერის აღმოჩენის არეალში და მინიმუმამდე ამცირებს გაფანტული სინათლის ჩარევას.
ფილტრების სამი ძირითადი ტიპი არსებობს:
1: გრძელგამტარი ფილტრი (LPF) - მხოლოდ გარკვეულ მნიშვნელობაზე მაღალი ტალღის სიგრძის სინათლის გავლის საშუალებას იძლევა.
2: მოკლევადიანი ფილტრი (SPF) - მხოლოდ გარკვეულ მნიშვნელობაზე დაბალი ტალღის სიგრძის სინათლის გავლის საშუალებას იძლევა.
3: ზოლის გამტარი ფილტრი (BPF) - მხოლოდ გარკვეული ტალღის სიგრძის დიაპაზონში სინათლის გავლის საშუალებას იძლევა.
ფილტრების სხვადასხვა კომბინაციით შესაძლებელია სხვადასხვა ტალღის სიგრძის ფლუორესცენციის სიგნალების ცალკეულ ფოტოგამრავლების მილებში (PMT) გადამისამართება. მაგალითად, PMT-ის წინ მწვანე ფლუორესცენციის (FITC) აღმოსაჩენად გამოიყენება LPF550 და BPF525 ფილტრები. PMT-ის წინ ნარინჯისფერ-წითელი ფლუორესცენციის (PE) აღმოსაჩენად გამოიყენება LPF600 და BPF575 ფილტრები. PMT-ის წინ წითელი ფლუორესცენციის (CY5) აღმოსაჩენად გამოიყენება LPF650 და BPF675 ფილტრები.
ნაკადური ციტომეტრია ძირითადად გამოიყენება უჯრედების დახარისხებისთვის. კომპიუტერული ტექნოლოგიების განვითარებასთან, იმუნოლოგიის განვითარებასთან და მონოკლონური ანტისხეულების ტექნოლოგიის გამოგონებასთან ერთად, მისი გამოყენება ბიოლოგიაში, მედიცინაში, ფარმაციასა და სხვა სფეროებში სულ უფრო ფართოვდება. ეს გამოყენება მოიცავს უჯრედების დინამიკის ანალიზს, უჯრედების აპოპტოზს, უჯრედების ტიპირებას, სიმსივნის დიაგნოსტიკას, წამლების ეფექტურობის ანალიზს და ა.შ.
გამოქვეყნების დრო: 2023 წლის 21 სექტემბერი
