(ნაკადის ციტომეტრია, FCM) არის უჯრედის ანალიზატორი, რომელიც ზომავს შეღებილი უჯრედის მარკერების ფლუორესცენციის ინტენსივობას. ეს არის მაღალტექნოლოგიური ტექნოლოგია, რომელიც შემუშავებულია ცალკეული უჯრედების ანალიზსა და დახარისხებაზე. მას შეუძლია სწრაფად გაზომოს და კლასიფიცირდეს ზომა, შიდა სტრუქტურა, დნმ, რნმ, ცილები, ანტიგენები და უჯრედების სხვა ფიზიკური თუ ქიმიური თვისებები და შეიძლება დაფუძნდეს ამ კლასიფიკაციის შეგროვებაზე.
ნაკადის ციტომეტრი ძირითადად შედგება შემდეგი ხუთი ნაწილისგან:
1 ნაკადის კამერა და სითხის სისტემა
2 ლაზერული სინათლის წყარო და სხივის ფორმირების სისტემა
3 ოპტიკური სისტემა
4 ელექტრონიკა, შენახვის, ჩვენების და ანალიზის სისტემა
5 უჯრედების დახარისხების სისტემა
მათ შორის, ლაზერული აგზნება ლაზერული სინათლის წყაროსა და სხივის ფორმირების სისტემაში არის ფლუორესცენციის სიგნალების მთავარი საზომი ნაკადის ციტომეტრიაში. აგზნების სინათლის ინტენსივობა და ექსპოზიციის დრო დაკავშირებულია ფლუორესცენციის სიგნალის ინტენსივობასთან. ლაზერი არის თანმიმდევრული სინათლის წყარო, რომელსაც შეუძლია უზრუნველყოს ერთი ტალღის სიგრძის, მაღალი ინტენსივობის და მაღალი სტაბილურობის განათება. ეს არის იდეალური აგზნების სინათლის წყარო ამ მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად.
ლაზერის წყაროსა და ნაკადის კამერას შორის არის ორი ცილინდრული ლინზა. ეს ლინზები ფოკუსირებას უკეთებენ ლაზერის სხივს წრიული კვეთით, რომელიც გამოსხივებულია ლაზერის წყაროდან ელიფსურ სხივში უფრო მცირე განივი კვეთით (22 μm × 66 μm). ამ ელიფსური სხივის შიგნით ლაზერის ენერგია ნაწილდება ნორმალური განაწილების მიხედვით, რაც უზრუნველყოფს უჯრედების განათების თანმიმდევრულ ინტენსივობას, რომლებიც გადიან ლაზერის აღმოჩენის ზონაში. მეორეს მხრივ, ოპტიკური სისტემა შედგება ლინზების, ქინძისთავებისა და ფილტრების მრავალი ნაკრებისგან, რომლებიც შეიძლება უხეშად დაიყოს ორ ჯგუფად: დინების კამერის ზემოთ და ქვემოთ.
ნაკადის კამერის წინ ოპტიკური სისტემა შედგება ლინზებისა და ხვრელისგან. ლინზისა და ქინძის ხვრელის (ჩვეულებრივ, ორი ლინზა და ხვრელი) მთავარი ფუნქციაა ლაზერის წყაროს მიერ გამოსხივებული წრიული კვეთით ლაზერის სხივის ფოკუსირება ელიფსურ სხივში უფრო მცირე განივი კვეთით. ეს ანაწილებს ლაზერის ენერგიას ნორმალური განაწილების მიხედვით, რაც უზრუნველყოფს უჯრედების განათების თანმიმდევრულ ინტენსივობას ლაზერის აღმოჩენის არეალში და ამცირებს მაწანწალა სინათლის ჩარევას.
არსებობს სამი ძირითადი ტიპის ფილტრი:
1: გრძელგამტარი ფილტრი (LPF) - მხოლოდ კონკრეტულ მნიშვნელობაზე მაღალი ტალღის სიგრძის სინათლეს გავლის საშუალებას აძლევს.
2: მოკლე გამტარი ფილტრი (SPF) - საშუალებას აძლევს მხოლოდ სინათლის გავლას, რომლის ტალღის სიგრძე დაბალია კონკრეტულ მნიშვნელობაზე.
3: გამტარი ფილტრი (BPF) - მხოლოდ ტალღის სიგრძის დიაპაზონის სინათლეს გავლის საშუალებას აძლევს.
ფილტრების სხვადასხვა კომბინაციებს შეუძლიათ სხვადასხვა ტალღის სიგრძის ფლუორესცენციის სიგნალები გადაიყვანონ ცალკეულ ფოტოგამრავლების მილებში (PMTs). მაგალითად, ფილტრები PMT-ის წინ მწვანე ფლუორესცენციის (FITC) გამოსავლენად არის LPF550 და BPF525. ფილტრები, რომლებიც გამოიყენება ნარინჯისფერ-წითელი ფლუორესცენციის (PE) გამოსავლენად PMT-ის წინ არის LPF600 და BPF575. ფილტრები წითელი ფლუორესცენციის (CY5) გამოსავლენად PMT-ის წინ არის LPF650 და BPF675.
ნაკადის ციტომეტრია ძირითადად გამოიყენება უჯრედების დახარისხებისთვის. კომპიუტერული ტექნოლოგიების განვითარებასთან ერთად, იმუნოლოგიის განვითარება და მონოკლონური ანტისხეულების ტექნოლოგიის გამოგონება, მისი გამოყენება ბიოლოგიაში, მედიცინაში, ფარმაციაში და სხვა სფეროებში სულ უფრო ფართოვდება. ეს აპლიკაციები მოიცავს უჯრედის დინამიკის ანალიზს, უჯრედის აპოპტოზს, უჯრედების ტიპირებას, სიმსივნის დიაგნოზს, წამლების ეფექტურობის ანალიზს და ა.შ.
გამოქვეყნების დრო: სექ-21-2023
