(ნაკადის ციტომეტრია, FCM) არის უჯრედების ანალიზატორი, რომელიც ზომავს ვიტრაჟების მარკერების ფლუორესცენტულ ინტენსივობას. ეს არის მაღალტექნოლოგიური ტექნოლოგია, რომელიც შემუშავებულია ცალკეული უჯრედების ანალიზისა და დახარისხების საფუძველზე. მას შეუძლია სწრაფად გაზომოს და დაასახოს უჯრედების ზომა, შინაგანი სტრუქტურა, დნმ, რნმ, ცილები, ანტიგენები და სხვა ფიზიკური ან ქიმიური თვისებები და შეიძლება დაფუძნდეს ამ კლასიფიკაციების შეგროვებას.
ნაკადის ციტომეტრი ძირითადად შედგება შემდეგი ხუთი ნაწილისაგან:
1 ნაკადის პალატისა და სითხეების სისტემა
2 ლაზერული შუქის წყარო და სხივის ფორმის სისტემა
3 ოპტიკური სისტემა
4 ელექტრონიკის, შენახვის, ჩვენების და ანალიზის სისტემა
5 უჯრედის დახარისხების სისტემა
მათ შორის, ლაზერული აგზნება ლაზერული შუქის წყაროსა და სხივის ფორმირების სისტემაში არის ფლუორესცენტური სიგნალების ძირითადი გაზომვა ნაკადის ციტომეტრიაში. აგზნების შუქის ინტენსივობა და ექსპოზიციის დრო დაკავშირებულია ფლუორესცენტური სიგნალის ინტენსივობასთან. ლაზერი არის თანმიმდევრული შუქის წყარო, რომელსაც შეუძლია უზრუნველყოს ერთჯერადი ტალღის სიგრძე, მაღალი ინტენსივობა და მაღალი სტაბილურობის განათება. ეს არის იდეალური აგზნების სინათლის წყარო ამ მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად.
ლაზერული წყაროსა და ნაკადის პალატას შორის ორი ცილინდრული ლინზია. ეს ლინზები ფოკუსირდება ლაზერული სხივი, ლაზერული წყაროდან გამოსხივებული წრიული ჯვარედინი სექციით, ელიფსურ სხივი უფრო მცირე ჯვარედინი მონაკვეთით (22 μm × 66 μm). ლაზერული ენერგია ამ ელიფსური სხივის შიგნით ნაწილდება ნორმალური განაწილების მიხედვით, რაც უზრუნველყოფს ლაზერული გამოვლენის არეალში გადის უჯრედების თანმიმდევრული განათების ინტენსივობას. მეორეს მხრივ, ოპტიკური სისტემა შედგება ლინზების, pinholes და ფილტრების მრავალრიცხოვანი კომპლექტისგან, რომლებიც შეიძლება დაახლოებით ორ ჯგუფად დაიყოს: ნაკადის პალატის ზემოთ და ქვემოთ.
ნაკადის პალატის წინ ოპტიკური სისტემა შედგება ობიექტივისა და პინელისგან. ობიექტივისა და პინჰოლის ძირითადი ფუნქცია (ჩვეულებრივ, ორი ლინზისა და პინჰოლით) არის ლაზერული სხივის ფოკუსირება ლაზერული წყაროს მიერ გამოსხივებული წრიული ჯვარედინით, ელიფსურ სხივში, მცირე ზომის ჯვარედინი. ეს ანაწილებს ლაზერულ ენერგიას ნორმალური განაწილების მიხედვით, რაც უზრუნველყოფს ლაზერული გამოვლენის არეალში უჯრედების მუდმივი განათების ინტენსივობას და მაწანწალა შუქისგან ჩარევის მინიმუმამდე შემცირებას.
ფილტრების სამი ძირითადი ტიპი არსებობს:
1: გრძელი უღელტეხილის ფილტრი (LPF) - მხოლოდ საშუალებას აძლევს შუქს ტალღის სიგრძით უფრო მაღალი, ვიდრე კონკრეტული მნიშვნელობა.
2: მოკლე უღელტეხილის ფილტრი (SPF) - მხოლოდ საშუალებას აძლევს შუქს ტალღის სიგრძეზე, კონკრეტული მნიშვნელობის გასწვრივ.
3: bandpass ფილტრი (BPF) - მხოლოდ საშუალებას აძლევს შუქს სპეციფიკური ტალღის სიგრძის დიაპაზონში.
ფილტრების სხვადასხვა კომბინაციამ შეიძლება შეცვალოს ფლუორესცენტური სიგნალები სხვადასხვა ტალღის სიგრძეზე ინდივიდუალურ ფოტომულტიპლიკატორის მილაკებზე (PMTs). მაგალითად, PMT– ის წინ მწვანე ფლუორესცენტის (FITC) გამოვლენის ფილტრებია LPF550 და BPF525. ფილტრები, რომლებიც გამოიყენება ფორთოხლის წითელი ფლუორესცენტის (PE) გამოსავლენად, PMT– ის წინ არის LPF600 და BPF575. PMT– ის წინ წითელი ფლუორესცენტის (CY5) გამოვლენის ფილტრებია LPF650 და BPF675.
ნაკადის ციტომეტრია ძირითადად გამოიყენება უჯრედების დახარისხებისთვის. კომპიუტერული ტექნოლოგიის წინსვლის, იმუნოლოგიის განვითარებით და მონოკლონური ანტისხეულების ტექნოლოგიის გამოგონებით, მისი პროგრამები ბიოლოგიაში, მედიცინაში, აფთიაქში და სხვა სფეროებში უფრო ფართოდ გავრცელებულია. ამ პროგრამებში შედის უჯრედების დინამიკის ანალიზი, უჯრედების აპოპტოზი, უჯრედების აკრეფა, სიმსივნის დიაგნოზი, წამლის ეფექტურობის ანალიზი და ა.შ.
პოსტის დრო: SEP-21-2023
